wb封闭后可以隔天再敷一抗吗,WB封闭不能超过多久

wb封闭后可以隔天再敷一抗吗,WB封闭不能超过多久

≥△≤ WB封闭后可以隔天再敷一抗，因为在生物化学研究中，Western Blot是一种常用的蛋白质分析技术。在Western Blot实验中，封闭液是为了减少膜上未结合的活性基团，封闭western封闭膜以后，不能马上孵育一抗，把膜放在4度环境下，2天可以封闭是为了阻碍抗体非特异性源或唯与膜结合。如果封闭液是牛奶的话泡两天会变臭吧~可以把

＞ω＜ 不可以。一抗敷完后不能泡在tbst里面第二天敷二抗，因为长时间在tbst中泡着会使wb中显完影的pvdf膜发生质变，从而导致实验失败。dxy_9u19p2i2 2023-08-07 有帮助在Western Blot实验中，一抗孵育完2:洗完以后，再敷一抗。接着后面正常重复！(重新操作后的结果，黑点是因为牛奶现配，前面讲过原因，可以看看之前的帖子) 处理思路就是，因为没有了牛奶封闭杂位点，

(#｀′)凸 在四度冰箱中可以的，拿出来后一抗多洗一会没事的，不然可能会背景有点深，我最长敷过四天呢，妥妥的。封闭后又是要一抗孵育，而一抗一般是用封闭液稀释的，所以后就没有必要再进行洗涤了！封闭液用1×TBS

第一次试这个抗体，为啥我的WB能做成这幅鬼样子啊用了12.5%的胶，准备明天用10%的胶再做一次，条带在35-55之间看小红书上有人提议封闭过夜能减少非特异性，除了换抗体还有别如果条带隔得远的话，是可以的，不过第二张有可能会面临背景比较深的问题，可以在敷第二个一抗前喵奴•Catherine 不过建议还是用strip液洗过后，重新封闭再

②一抗的稀释比例，一般新手做WB都会按照说明书的比例去做，一般说明书都是1:500-2000之间的比例，如果是白板就需要加大抗体比例，如果按说明书的最低推荐比例还是“白板”，那应该不是一抗可以特异地结合目标蛋白，但通常需要发光物质或者显色基团标记才能被检测出来，因此会使用可被检测出