敷一抗前忘了封闭,封闭抗体做了四次不转阳

敷一抗前忘了封闭,封闭抗体做了四次不转阳

(ˉ▽ˉ；) 觉得影响还是有的，背景会很亮，有可能看不出条带。毕竟硝酸纤维膜和蛋白结合只是物理的吸附，与一抗和目的蛋白的结合的能力相同，要是洗的话，可能都会洗掉首先明白，大多实验室转完膜之后，都是去封闭，一般而言两种处理，一是5%的脱脂牛奶(雀巢就有脱脂的，tbst溶解稀释，5%-10%效果都可以的，tbst溶解牛奶前面的帖子我讲

封闭完成后要进行洗膜，以去除膜上未结合的封闭试剂。洗涤液使用TBST 或者PBST。一抗孵育(Primary antibody incubation) 2.1 参考一抗的说明书，按照适当比例yj1984ren 丁香评论员没封闭结果肯定不好；如果刚开始学着做，可以往后做做给自己积累经验2022-07-

˙▽˙ 抗体除了会和抗原特异性结合，还会由于静电吸附及其他非特异性反应结合在其他位置上，加BSA——就是先加一种蛋白质去可能会和抗体非特异性结合的位点结合先，这wufujun_01 楼上的补救方法从理论上绝对赞成但如果没有封闭，即使一抗用奶粉稀释也不会弥补过来，一

western blot加一抗前忘了封闭会有什么后果？对你的目的条带影响不大不过可能有会杂带而且背景会不干净不可能完全没影响不然何必多这么个一小时的步骤三首页发现业务合作创作者服务新闻中心关于我们社会责任加入我们中文AAA农贸市场张姐关注WB有一张条带忘记封闭直接孵一抗了。。。真的不想重新再跑一次了，想问一下可不可

分子量200+的目标蛋白，我给搞忘记封闭了，可不可以用TBST多洗几次以后孵了二抗去显影😭😭😭真的不想重新来了03-01IP 重庆1334 浏览全部讨论(5) 小N同学很大可能会重来，封闭一般不会，不过不推荐封闭过长时间天一湖医者2022-03-28 有帮助封闭时间过短可能会敷不上，过长一般不会。未来9 2022-03-28 有帮助如果一抗封闭时间过长，非特异性的条带也会被染上一抗，这样再