250kd蛋白大小对应的胶浓度,怎样跑300kd的蛋白

250kd蛋白大小对应的胶浓度,怎样跑300kd的蛋白

根据蛋白大小选择合适电泳胶浓度，确保不同蛋白迁移速率与分离程度最优。同张膜检测大分子和小分子蛋白建议使用梯度分离胶(先倒高浓度胶分离小蛋白，再倒低浓度胶分离大蛋白)。本人经蛋白大小30KD,12%分离胶半干法转移，电流：0.8x膜面积(mA),电压显示4-6v(师姐说她用的时候是50v左右).2h 寻求大家的帮助drizzly wrote: 想请教一个问题，我做WB时，电泳半个小

【求助】请教220KD蛋白胶的浓度及转膜条件我在做220KD的蛋白，用的8%的分离胶，转膜条件是湿转400mA 2.5小时(BIO-RAD)结果没曝出来。不知道胶的浓度合不合适？标准的电转缓冲液为1X Tris-glycine buffer 不含SDS,但加入20%甲醇，如果转膜的蛋白分子量大于80KD,则推荐加入SDS使之终浓度为0.1%。半干式转膜中，三明治的排列

电泳速度明显变慢，但在上面的大分子量marker还是继续往下跑，最后指示剂不会跑出胶底端，同时250kD(我们的经验)会在距离分离胶/楼主楼主楼主，我的蛋白量14和16基本上16每次都能跑出来，但是14就跑出过来一次，我这几次用的15%的分离胶。这两次跑出来的蛋白特别宽，特别宽，如图(就看最左边两条带),为什么呀？

本产品包含了从10kDa到250 kDa共11种纯化的预染蛋白质(10, 15, 20,25,30,40,50, 72,100,130,250 kDa),其中72kDa条带为橙色，25kDa条带为绿色，其余条带为蓝色。主要用于SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳过程楼上的，我也做的250KD左右的，结束了。实验是比较难出一次很好的，重复性不是很高。分离胶7%-8%就

280KD的蛋白7.5%的胶也能跑，大分子蛋白主要在转膜，转膜缓冲液甲醇含量适当降低到10%~15%，其他不变预制胶板尺寸9.8×8.4×0.41cm 孔数10孔缓冲体系HEPES缓冲体系最大上样量60μL 电压150～180 V 浓缩胶4%,1.4cm 货号凝胶浓度电泳时间分离范围(kD) 非变性变性GS4808GS48867.5%30～50min40~200