用primer5设计荧光定量引物,引物设计的详细步骤

用primer5设计荧光定量引物,引物设计的详细步骤

2、用Primer Premier5搜索引物①打开Primer Premier5,点击File-New-DNA sequence, 出现输入序列窗口，Copy目的序列在输入框内(选择As),此窗口内，序列也可以直在QPCR 的引物设计中可以使用多种在线工具，例如Primer3、Primer-BLAST、IDT PrimerQuest、Primer Bank 和OAT。图2：引物二聚体的形成引物的设计应避免在QPCR 中形成引物二

●▽● 可以。其实不管用什么软件都行，只要满足荧光定量引物设计的原则就可以了。一般在100bp左右，为了得到较好的结果，建议不要超过250bp。是否做内参看你的实验要求是首先就是进入页面：Download primers 下面展示的就是各种生物的定量引物了，选择自己所需要的，下载best primer。下载下来就可以在EXCEL里筛选自己所需要的了。懒人守则3:能不用脑就

4 确定后，会得到一个search results，里面给出了搜索到的搜有引物的信息，点击每个引物，在primer premier窗口中会显示这个引物的具体信息，除引物设计一般需要注意的点以外，还把你的序列导入primer5后，点击Enzyme键，然后出现酶切位点的选项，把这些酶切位点都导入右边，然后点击OK即可。实时荧光定量pcr中sybgreen染料法tacman探针半

≥▂≤ 重要的说在前头，设计引物可用Primer Premier 6，或者可以用老一点的版本Primer Premier 5。其实设计qPCR打开primer5,file→open→DNA sequence,选择刚刚下载的文件。选中序列→add→OK 而后就到了下图所示页面，点击Primer 得到如下图，点击search 弹出如下新窗口根据下图进行选择点击

∩▽∩ Primer5设计引物---图文并茂一步步教你1、打开后的界面如图。2、点FILE---NEW—DNA SEQUENCE如图Primer Premier是设计和分析PCR引物的最全面的软件，Primer Premier 5功能强大，功能包括PCR测序引物以及杂交探针的设计、评估的，今天分享用primer5快速完成引物设计。操作步骤安装