跑胶条带不直,质粒跑胶三条带位置

电泳跑胶原理 2023-12-04 23:02 931 墨鱼

电泳跑胶原理

跑胶条带不直,质粒跑胶三条带位置

琼脂糖凝胶电泳DNA 迁移速率与分子大小和构象相关，分子构象越大，摩擦阻力越大，第一条带是超螺旋带应该最亮，因为超螺旋结构完整紧密，跑得最快。第二条带为直链注意密闭性（否则漏液），如果内槽漏液就不是匀强电场了，最后条带可能就不是一条直线。

可能原因1.胶制的不够均匀，胶的密度不够均一。2.胶块放置的没和电泳槽平行。3.胶块中有气泡。等等。。。如图，分子量17kDa,上样量是根据蛋白浓度加到20ug,条件都是小分子膜的条件，抗体用了几次但是其他同时配的抗体依然能跑出来。这种情况之前出现过，一直不知道是什么原因，向大佬们请教[

其次你的引物设计要有足够特异性，长度可以稍微长一点，可以一次多设计几对，因为你不一定一次就能P出来。2. PCR体系建议先用50μL,上大孔胶跑条带切胶回收(必须进行)。你的目的基因必★ 观察maker的情况，一般目的条带跑到分离胶的2/3处比较好★ Maker尽量点在两边而不是在中间，或者在剥离胶后和PVDF膜的一角减掉一小块作为标记。⑥ 跑完电泳后，取出胶，可以一块

＞△＜最为可怕的是我们的样品在保存过程中内源性剪切和蛋白聚合形成复合物是同时进行，这也是导致我们明明很好的样品在存放数年后跑胶看不到任何条带的原因。三、实验小结通过上述一系分析测试，百科网，琼脂糖凝胶电泳Marker条带不直，.首先要排除琼脂糖凝胶配制的是否正确，如果齿孔不规则或残余凝胶颗粒则会使条带不规则；2.检查电泳槽的电极是否出现移位、歪

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